Cara Pembekuan-Gawe Budaya Bakteri (Lyophilization)

Lyophilization, utawa beku pangatusan, minangka prosedur laboratorium cendhak

Pembekuan beku, uga disebut lyophilization utawa cryodesiccation, yaiku proses ngilangi banyu saka prodhuk kasebut sawise dibekukan (lan banjur dileburake ing vakum) supaya ew bisa ngowahi saka sing padhet menyang uap tanpa ngalami fase cair. Es (utawa pelarut beku liyane) dibusak saka sawijining produk liwat proses sublimasi lan molekul banyu kaiket dibusak liwat proses desorpsi.

Dasar-dasar Lyophilization

Salah siji cara sing paling apik kanggo nyimpen bakteri, jamur, ragi, utawa kultur mikroorganisme liya sajrone wektu sing suwe yaiku nggunakake proses pembekuan beku. Prosedur laboratorium cendhak iki bisa dilakokaké karo beku-pengering sing bisa didhukung sacara komersial sing bakal nglindhungi koleksi budaya. Amarga lyophilization minangka wangun pangatasan sing paling rumit lan larang, proses iki biasane diwatesi kanggo bahan alus, sensitif panas sing dhuwur. Bahan kimia sing ora rusak dening pembekuan bisa dibédakaké liwat lyophilized saéngga panyimpenan sing kélangan ora perlu.

Proses iki bisa nganti sethithik telung jam, lan nganti 24 jam, ora kalebu wektu wutah budaya.

Langkah-langkah Lyophilization Langkah-langkah

1. Utawa, tuwuh kabudhayan sewengi, utawa pekarangan, saka mikroorganisme ing LB utawa plate agar-agar gizi sing cocok.

2. Sabanjure, nyiyapake vials kapur steril kanthi autoclaving ahead of time, karo tutup (stoppers karet) diselehake loosely ing ndhuwur. Label label kertas dicithak kanthi identifikasi budaya ing njero tabung sadurunge autoclaving. Utawa, nggunakake tabung kanthi kapital sing dirancang kanggo sterility .

1. Tambahake 4 mL lyophilization buffer ing piring. Yen perlu, sèl bisa digantung nganggo rod kaca steril.

2. Cepet ngalerake suspensi budaya menyang botol steril. Tambah kira-kira 1,5 mL saben botol. Nyelehake tutup karet.

3. Beku kothak kandhungan budaya ing vials kanthi nempatake vial ing kulkas -20 derajat Celcius.

1. Sawise kabudayan beku, nyiyapake beku-pengeringan kanthi ngowahi lan ngidini wektu kanggo suhu lan kondisi vakum sing cocok kanggo nyetabilake. Apa iki miturut pandhuan Produsèn kanggo merek beku-pengering sing sampeyan gunakake.

2. Ati-ati, lan aseptik, nyelehake tutup tutup vial ing ndhuwur tutup, supaya lembab bisa lolos sajrone proses pembekuan beku, lan pasang vial kasebut menyang kamar pembeku. Aplikasi vakum menyang kamar miturut instruksi produsen.

3. Nyengkuyung wektu budaya kanggo ngrampungake lyophilize (garing). Iki bisa njupuk saka sawetara jam kanggo sewengi gumantung saka volume saben sampel lan jumlah sampel sing sampeyan duwe.

4. Copot sampel saka kamar pembeku-beku miturut instruksi pabrik lan langsung tutup segel vial kanthi cap karet, banjur topeng kelim.

5. Simpen koleksi kultur lyophilized ing suhu kamar.

Produk Sampeyan Bakal Perlu

• Freeze-dryer
• Nutrisi utawa piring agar cocok (lan inkubator kanggo tuwuh kabudhayan)
• Gelas kaca
• Buffer lyophilization
• Vials crimp-top karo stoppers karet (lan crimper kanggo aplikasi tutup)
• Freezer

<sub>Wigati:

SP Ilmiah. Prinsip dhasar saka beku pangatusan. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>