Buffer iki bisa digunakake kanggo aplikasi biologi ing pH netral cedhak
Nilai telung pKa kanggo asam fosfat (saka Buku Panduan Kimia lan Fisika CRC) yaiku 2.16, 7.21 lan 12.32. Monosodium fosfat lan basa konjugasi, disodium fosfat biasane digunakake kanggo ngasilake buffer nilai pH watara 7, kanggo aplikasi biologi, kaya sing ditampilake ing kene.
Nggawe buffer iki luwih angel tinimbang nggawe buffer TAE lan TBE. Nanging ora angel banget. Mung rata-rata. Sampeyan kudu njupuk kira-kira 10 menit kanggo mecut munggah buffer iki. Kene carane.
1. Temtokake Property Buffer
Sadurunge nggawe buffer, sampeyan kudu ngerti apa molarity sampeyan pengin, apa volume kanggo nggawe lan apa pH sing dikarepake. Paling buffer paling apik ing konsentrasi antara 0.1 M lan 10 M. PH kudu ana ing 1 pH unit asam / basa konjugat pKa. Kanggo prasaja, pitungan sampel iki kanggo 1 liter buffer.
2. Nemtokake Rasio Asam kanggo Base
Gunakake persamaan Henderson-Hasselbalch (ing ngisor) kanggo nemtokake apa rasio asam kanggo basa dibutuhake kanggo nggawe penyangga pH sing dikarepake. Gunakake nilai pKa paling cedhak pH sing dikarepake lan rasio bakal nuduhake pasangan basa konjugasi asam sing cocog karo pKa.
Persamaan HH: pH = pKa + log ([Basa] / [Asam])
Kanggo penyangga pH 6,9, [Asam] / [Asam] = 0,4898
Pengganti kanggo [Asam] lan Ngatasi kanggo [Basa]
Molaritas sing dikarepake yaiku buffer [Asam] + [Asam].
Kanggo buffer 1 M, [Asam] + [Asam] = 1 lan [Asam] = 1 - [Asam]
Kanthi ngganti iki menyang rumus rasio, saka langkah 2, sampeyan bisa:
[Asam] = 0.6712 mol / L
Ngatasi kanggo [Asam]
Nggunakake persamaan: [Basa] = 1 - [Asam], sampeyan bisa ngetung sing:
[Basa] = 0.3288 mol / L
3. Campuran Asam lan Konjugasi Base
Sawise sampeyan nggunakake persamaan Henderson-Hasselbalch kanggo ngitung rasio asam kanggo basa sing dibutuhake kanggo penyangga sampeyan, nyiyapake mung sajrone 1 liter larutan nggunakake jumlah monosodium fosfat lan disodium fosfat sing bener.
4. Priksa pH
Gunakake probe pH kanggo ngonfirmasi yen pH sing bener kanggo buffer wis tekan. Nyetel rada perlu, nggunakake asam fosfat utawa natrium hidroksida (NaOH).
5. Mbatesi Volume
Sawise pH sing dikarepake tekan, nggawa volume buffer nganti 1 liter. Banjur ngencerake buffer kaya sing dikarepake. Penyangga sing padha bisa diencerake kanggo nggawe buffer saka 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M utawa apa wae ing antarane.
6. Tip kanggo Buffer
Elinga yen pKa ora gampang diukur kanthi nilai sing tepat. Nilai-nilai sing rada beda bisa uga kasedhiya ing literatur saka macem-macem sumber.
7. Apa Sampeyan Perlu
Kanggo nggawe buffer, sampeyan butuh telung bahan, dene materi sing isih ana yaiku peralatan. Bahan kasebut yaiku monosodium fosfat, disodium fosfat, lan asam fosfat utawa natrium hidroksida kanggo nyetel pH.
Sampeyan uga kudu meter pH lan probe lan labware cocok. Iki kalebu flask volumetrik, silinder lulus, beakers lan bar stir.
Paling pungkasan, sampeyan kudu hotplate aduk.