Buffer iki Digunakna kanggo Ngrikani Gerakan DNA
Penyangga iki nduweni kekuatan ion sing kurang lan kapasitas buffer kurang. Iku paling cocok kanggo elektroforesis saka gedhe (> 20 kb) potongan DNA lan kudu diganti asring utawa direproduksi maneh (> 4 jam) gel roto kaping.
Kanthi atine, sampeyan uga pengin nimbang sawetara bongkahan.
Given yen buffer gampang kanggo nggawe lan langkah-langkah bisa digawa cepet, nggawe luwih saka siji kumpulan ing wektu ngirim ora utamané wektu-akeh utawa angel ditarik mati. Nggunakake instruksi ing ngisor iki, kudu njupuk mung 30 menit kanggo nggawe buffer TAE. Punika kepengin:
Siapke Solusi Stock saka EDTA
Larutan asam EDTA (etilenediamine tetraacetic) disusun luwih dhisik. EDTA ora bakal rampung dadi larutan nganti pH disetel kira-kira 8.0. Kanggo solusi stock 500-mililiter saka 0.5 M EDTA, bobot 93,05 gram EDTA disodium uyah (FW = 372.2). Dissolve ing 400-milliliters deionized water and adjust the pH with sodium hydroxide (NaOH). Ndhuwur solusi kanggo volume akhir 500 mililiter.
Mecut Up Solution Stock TAE
Gawe solusi saham (50x) konsentrasi TAE kanthi ngebaki 242 gram dasar Tris (FW = 121.14) lan dissolving ing kira-kira 750 mililiter banyu deionisasi.
Kudu nambahake 57,1 mililiter asam glasial lan 100 mililiter saka 0,5 M EDTA (pH 8.0). Sawise kuwi, nyetel solusi menyang volume final 1 liter. Solusi saham iki bisa disimpen ing suhu kamar. Ing pH buffer iki ora disetel lan kudu babagan 8.5.
Siapke Solusi Kerja TAE
Larutan kerja buffer 1x TAE digawe kanthi nyilikake solusi saham kanthi 50x ing banyu deionisasi.
Konsentrasi solute sing pungkasan yaiku 40 mM. Tris-asetat lan 1 mM EDTA. Penyangga saiki wis siap dienggo nganggo gel agarose.
Apa Sampeyan Perlu Buffer
Wiwit nggawe buffer TAE mung mbutuhake instruksi sing cepet lan prasaja, jumlah bahan sing dibutuhake iku ora gedhe banget. Sampeyan mung perlu EDTA disodium salt, Tris base, lan asam asetat glasial.
Nggawe buffer uga mbutuhake pH meter lan standar kalibrasi, kaya sing cocok. Sampeyan uga perlu 600 mililiter lan 1500 mililiter cacahe utawa cairan uga silinder lulus. Akhire, sampeyan butuh banyu deionisasi, ngocok bar, lan nyampur piring.
Wrapping Up
Ngendi sampeyan arep nggawe penyangga - ing situs sekolah, situs karya, utawa lokasi liyane, kayata omah sampeyan? Priksa persediaan sadurunge sampeyan miwiti kanggo mesthekake yen sampeyan duwe kabeh bahan ndhuwur kanggo buffer TAE.
Yen sampeyan luwih seneng ora kudu mbayar bahan, milih supaya buffer ing njaba omah dianjurake. Sampeyan bisa kanthi gampang supaya supaya bahan-bahan sing sampeyan butuh online utawa ngunjungi toko khusus kanggo wong-wong mau.