Vektor Apa Lakukan Kanthi Gen lan Kloning
Ing kloning molekuler, vektor minangka molekul DNA sing minangka operator kanggo ngirim utawa nglebokake génan asing menyang sel liyane, ing ngendi bisa direplikasi lan / utawa ditulis. Vektor iku minangka alat sing penting kanggo kloning gene lan paling migunani manawa uga ngode encoding jenis penanda gene sing nyandi molekul bioindicator sing bisa diukur sajroning penilaian biologi kanggo njamin panyimpangan, lan ekspresi, ing organisme inang.
Khususé, véktor kloning yaiku DNA sing dijupuk saka virus, plasmid utawa sel (organisme sing luwih dhuwur) kanggo dilebokaké karo fragmen DNA manca kanggo tujuan kloning. Wiwit vektor kloning bisa dikelola kanthi tetep ing organisme, vektor uga ngandhut fitur sing ngidini panyimpenan utawa penghapusan DNA sing trep. Sawisé dikloning dadi vektor kloning, fragmen DNA bisa uga digabungake menyang vektor liyane sing bisa digunakake kanthi luwih spesifik.
Ing sawetara kasus, virus digunakake kanggo nginfèksi bakteri. Virus kasebut disebut bacteriophages, utawa phage, kanggo short. Retroviruses minangka vektor banget kanggo ngenalake gen menyang sel kewan. Plasmid, sing dadi potongan bunderan DNA, minangka vektor sing paling umum dipigunakaké kanggo ngenal DNA asing menyang sel bakterial. Padha asring nindakake gen resistance antibiotik sing bisa digunakake kanggo nyoba ekspresi DNA plasmid, ing piring antibiotik.
Transfer gen menyang sel tanduran biasane dilakoni kanthi nggunakake bakteri tanah Agrobacterium tumefaciens , sing dadi vektor lan nglebokake plasmid gedhe menyang sel inang. Mung sing sel sing ngemot vektor kloning bakal tuwuh nalika antibiotik ditemokake.
Tipe Mayor Cloning Vector
Ing enem jinis vektor utama yaiku:
- Plasmid. DNA ekstrachromosomal sirkular sing otomatis ngringkebake ing sel bakterial. Plasmid umumé duwe nomer salinan dhuwur, kayata pUC19 sing nduwèni salinan 500-700 salinan saben sel.
- Phage. Molekul DNA linier diturunake saka bacteriophage lambda. Bisa diganti karo DNA manca tanpa ngganggu siklus urip.
- Cosmids. Molekul DNA extrachromosomal bunder liyane sing nggabungake fitur plasmid lan phage.
- Kromosom Artificial Bakteri. Adhedhasar plasmid mini-F bakteri.
- Kromosom kromosom ragi. Iki minangka kromosom gawean sing ngandhut telomeres (buffer paketan ing ujung kromosom sing dipotong nalika divisi sel) karo asal-usul replikasi, centromere ragi (bagéan saka kromosom sing ngubungake kromatid adhine utawa dyad), lan penanda sing bisa dipilih kanggo identifikasi ing ragi sel.
Kromosom Kromosom Manungsa. Jenis vektor iki potensial migunani kanggo pangiriman gen menyang sel manungsa, lan alat kanggo ekspresi ekspresi lan nemtokake fungsi kromosom manungsa. Bisa nggawe potongan DNA sing gedhe banget.
Kabeh vektor sing direkayasa nduweni asal saka replikasi (replikator), sawijining situs kloning (papane penyisipan DNA manca ora ngrusak replikasi utawa inaktivasi penanda penting), lan penanda sing bisa dipilih (biasane gen sing nyedhiyakake resistance marang antibiotik.)