Kinetik Enzim Pengukuran
Minangka minangka latar mburi, enzim minangka protèin sing minangka katalis ing ngurangi jumlah energi aktivasi kanggo reaksi sing bakal dumadi. Energi aktivasi yaiku energi sing dibutuhake kanggo entuk reaksi "diwiwiti" amarga akeh reaksi ora kedadeyan kanthi cepet (utawa kedadeyan) yen bisa termodinamika.
Enzim ngartèksi reaksi tartamtu ing situs tartamtu (dikenal minangka situs aktif) ing endi réaktan duwé ikatan lan réaksi kanggo ngasilaké barang kasebut. Substrat duwe situs aktif sing khusus mung kanggo wong-wong mau supaya ora ngemot utawa nanggepi bahan kimia ing situs sing padha. Kaya kunci lan kunci, saben enzim bakal ngasilake mung siji reaksi tartamtu (karo sawetara pangecualian).
Aktivitas spesifik digunakake ing metode isolasi protein kanggo nuduhaké persentasi pemurnian. Penting ngerteni unit iki nalika mundhut enzim kanggo nemtokake persis yen enzim murni sing ditampa.
Nalika ngukur kinetika enzim (tingkat réaksi enzim kanthi substrat - utawa permukaan), aktivitas spesifik ditemtokake minangka jumlah substrat sing diowahi enzim (reaksi katalis), saben mg protein ing persiapan enzim, saben unit wektu.
Conto kegiatan tartamtu yaiku:
- Aktivitas khusus saka enzim sing diisolasi diukur ing 150 umol / min / mg protein sadurunge dimurnikan lan 800 umol / min / mg, sawise dimurnikan.
Aktivitas spesifik minangka langkah kesuburan enzim sing penting. Sakabeh beda saka enzim sing murni kudu duwe nilai sing padha lan malah diluting solusi enzim akeh kali bakal duwe nilai kegiatan spesifik sing padha sanajan bakal ana nilai aktivitas enzim sing beda. Iki amarga ngitung aktivitas tartamtu, numerator (unit / ml) lan denominator (mg / ml) sing kena pengaruh.
Aktivitas spesifik beda banget karo kegiatan, nanging pitungan aktivitas tartamtu isih gumantung marang nilai kegiatan. Iki tegese nilai kegiatan spesifik kasebut uga bakal gumantung marang definisi unit enzim.
Saben enzim sing nduweni nilai luwih spesifik tinimbang sing dikarepake bisa ngandhut molekul enzim sing wis diowahi utawa dicampur karo impurities.
Faktor Aktivitas Enzim sing Ndadekake
Sampeyan bisa nemtokake yen siji enzim bisa duwe nilai aktivitas sing diukur beda nalika diukur ing laboratorium sing beda-beda (yaiku beda nyata ing kegiatan sing diukur, ora beda-beda sing disebabake dening nggunakake definisi unit liyane).
Cara pangujian sing ditindakake (metode pengujian kanggo nemtokake kemurnian enzim) bakal nimbulaké nilai-nilai kegiatan dilapurake. Contone, enzim umume luwih aktif ing suhu 37 derajat Celcius dibandhingake karo 20 derajat Celsius, supaya yen pengujian ditindakake ing 21 derajat Celsius, nilai-nilai kasebut bakal beda-beda saka assay sing dianakake ing suhu 32 derajat Celsius (biasane , tes kasebut dilakoni ing suhu antara 20-37 derajat Celsius).
Mangkono, definisi unit enzyme luwih apik bakal diumumake minangka 1 unit (U) yaiku jumlah enzim sing ngetalke reaksi 1 nmol saka substrat per menit miturut kondisi standar.